Поперечний переріз зображення органоїда сітківки отримали за допомогою мікроскопа. Кожен колір являє окремий тип білка. Дослідження опубліковано в журналі Nature Biotechnology.
Дослідники зі Швейцарської вищої технічної школи Цюріха ETH Zurich використовували техніку 4i для створення нового клітинного атласу сітківки ока людини. Протягом 18 днів робот зробив знімки 18 різних партій забарвлених білків. В кінцевому підсумку, вчені отримали барвисте мікроскопічне зображення, на якому видно 53 різних типи білків.
При флуоресцентній мікроскопії тканини візуалізуються з використанням флуоресцентних барвників для певних білків. Але цю техніку можна використовувати тільки з трьома-п’ятьма різними барвниками одночасно, що обмежує деталізацію, яку можна відобразити на одному зображенні.
Щоб розширити деталі в 10 разів, автори дослідження скористалися новою технікою — ітеративною непрямою імунофлуоресцентною візуалізацією (англ. iterative indirect immunofluorescence imaging, 4i). Основний принцип досить простий: після того, як вчені зробили знімок і провели вимірювання з використанням трьох барвників, треба вимити барвники зі зразка, а потім фарбувати його ще трьома. Вони повторювали це знову і знову. Потім вчені використовували комп’ютер, щоб об’єднати всі знімки в один. У підсумку, вийшло одне мікроскопічне зображення з маркуванням десятків типів білків.
Повне зображення сітківки 4i, що показує складні деталі тканини. Фото в повному дозволі є за посиланням.
Фото: Вале і ін., Nature Biotechnology
